Diagnosis to detect porcine transmissible gastroenteritis virus (TGEV) by optical and transmission electron microscopy techniques / Diagnóstico para detectar el virus de la gastroenteritis porcina transmisible por técnicas de microscopía óptica y electrónica de transmisión

The porcine transmissible gastroenteritis is a highly severe contagious disease, caused by virus of the Coronaviridae family, genus Coronavirus. Its epizootic shape can reach a rate of up to 100 percent mortality in piglets under two weeks of age as a result of severe dehydration. In this study fragments of small intestine and stool samples were collected from 75 autopsied pigs from properties. The samples of the fragments were frozen and sent to the Laboratory of Electron Microscopy, Instituto Biológico, SP, Brazil, for histological and transmission electron microscopic analyses. According to histological H&E technique, atrophy, villous necrosis and destruction of the enterocytes were observed in 35 (46.6 percent) out of the 75 fragments of the small intestine samples. On the immunohistochemistry technique 19 (25.3 percent) fragments were positively stained with DAB in the Ag-Ac reaction (MabTGEV). In 19 (25.3 percent) positive samples analyzed by in situ hybridization, a brown stain of enterocytes was observed, mainly in the epithelial cells of the villi. By the negative staining technique, we visualized enveloped, pleomorphic coronavirus particles, with typical radial projections resembling solar corona, with 140 nm diameter in 21 samples (28 percent) of the small intestine fragments and in 16 (21.3 percent) stool samples. In the ultrathin sections of 21 (28 percent) samples of small intestine, complete coronavirus particles with 80 nm diameter were seen among the microvilli and in the cytoplasm of epithelial cells. Immature particles with 60 nm diameter, budding from cell membrane and from a rough endoplasmic reticulum and also inside the vacuoles were visualized. In 19 (25.3 percent)...

La gastroenteritis transmisible porcina se caracteriza por ser una enfermedad altamente contagiosa y aguda, causada por virus de la familia Coronaviridae, género Coronavirus. Su forma epizoótica puede alcanzar una tasa de hasta 100 percent de mortalidad en lechones con menos de dos semanas de edad, como resultado de deshidratación severa. En este trabajo se recogieron 75 fragmentos de intestino delgado y muestras de heces de 75 cerdos autopsiados. Las muestras se congelaron y se enviaron al Laboratorio de Microscopía Electrónica, del Instituto Biológico, SP, Brasil, para el análisis histológico y por microscopía electrónica de transmisión. Por la técnica histológica de H&E fue observado atrofia y necrosis de la vellosidades además de la destrucción de los enterocitos en 35 (46,6 ppor ciento) de las 75 muestras de fragmentos del intestino delgado. Por inmunohistoquímica 19 (25,3 por ciento) de los fragmentos se tiñeron positivamente por el DAB en la reacción Ag-Ac (MabTGEV). En 19 (25,3 por ciento) muestras positivas mediante hibridación in situ, se observó tinción marrón de los enterocitos, principalmente en las células epiteliales de las vellosidades. Por la técnica de coloración negativa, se observaron partículas de coronavirus, encapsuladas, pleomórficas con proyecciones radiales típicas, en forma de corona solar, midiendo alrededor de 140 nm de diámetro en 21 (28 por ciento) muestras de fragmentos del intestino delgado y en 16 (21,3 por ciento muestras de heces. En cortes ultra finos de 21 (28 por ciento) fragmentos de intestino delgado fueron visualizadas partículas de coronavirus completas con 80 nm de diámetro entre las microvellosidades y en el citoplasma de las células epiteliales y partículas inmaduras de 60 nm de diámetro brotando de las membranas celulares y del retículo endoplasmático rugoso y en el interior de las vacuolas. En 19 (25,3 por ciento)...

Relación endoscópica entre duodenitis inespecífica y sobrecrecimiento bacteriano del intestino delgado / Endoscopic relationship between non specific duodenitis and snall intestine bacterial overgrowth

Cuando aparece una proliferación de la flora de tipo colónico en el intestino delgado se producen alteraciones en la digestión y absorción intestinal, que clínicamente conforman el síndrome del Sobrecrecimiento Bacteriano del Intestino Delgado (SBID). En el SBID la concentración bacteriana aumenta hasta 107-109 UFC/ml en intestino delgado. El principio del test de hidrógeno espirado es la administración de un carbohidrato (Lactulosa, dxilosa, glucosa), que al ser degradado por las bacterias produce un aumento de los niveles de hidrógeno espirado en pacientes con SBID. Hipótesis: Si la duodenitis inespecífica se manifiesta clínicamente de manera similar al (SBID) entonces puede haber una relación entre ambas patologías. Métodos: Se realizó un estudio clínico descriptivo prospectivo de una muestra seleccionada quienes tuvieron como hallazgo en la endoscopia digestiva superior duodenitis inespecífica. Se usó Video endoscopio Olympus GIF-140, en dicha endoscopia se tomó biopsia del tejido duodenal con pinza. Posteriormente el paciente fue sometido a prueba de hidrógeno en aliento aire espirado con 10 gr de Lactulosa. Resultados: La prueba de Hidrógeno en aliento resultó positiva en 18 pacientes (29,5%) y negativo en 43 (70,5%) (p=1,000). La sensibilidad fue de 29,6% y Especificidad 71% (IC 95%). Conclusiones: 1) La prueba de Hidrógeno en aire espirado con Lactulosa es una prueba con poca sensibilidad pero específica para el Diagnóstico de SBID. 2) La prevalencia de duodenitis giardiásica fue del 11,5% en la población estudiada. 3) Los hallazgos histológicos referentes a las alteraciones de las vellosidades intestinales no están correlacionados con el SBID.

When a proliferation of the flora of type colonic appears in the small intestine they are caused by alterations in the digestion and intestinal absorption, which they make up clinically the syndrome of the Small Intestine Bacterial Overgrowth (SIBO). In SIBO the bacterial concentration increased to 107-109 UFC/ml in the small intestine. The origin of the exhaled hydrogen test is the administration of a carbohydrate (Lactulose, d-xylose, glucose), which when broken down by the bacteria produce an increase in the levels of the exhaled hydrogen in patients with SIBO. Hypothesis: If the non-specific duodenitis appears clinically similar in a way to (SIBO) then there may be a connection between both pathologies. Methods: We carried out a prospective descriptive clinical trial of a selected sample who had the finding of nonspecific duodenitis in the upper endoscopy. We used Video endoscope Olympus GIF-140, in that endoscopic was taken biopsy of the duodenal tissue with forceps. Subsequently, the patient was undergone of Breath-hydrogen test with 10 gr of lactulose. Results: the hydrogen breath test was positive in 18 patients (29.5%) and negative in 43 (70.5%) (p = 1.000). The sensitivity was 29.6% and specificity 71% (95%). Conclusions: 1) Hydrogen breath test with lactulose is less sensitive but specific for the diagnosis of SIBO. 2) The prevalence of giardiasic duodenitis was 11.5% in our trial. 3.) Histological findings regarding alterations of the intestinal villi are uncorrelated with SIBO.

Detection of coronavirus in capybaras (Hydrochoeris hydrochaeris) by transmission electron microscopy in São Paulo, Brazil / Detección de coronavirus in capybaras (Hydrochoeris hydrochaeris) por microscopía electrónica de transmisión en São Paulo, Brasil

Coronaviruses are enveloped, positive-stranded RNA, belongs to the Nidovirales order, Coronaviridae family and are classified into three groups. Groups 3a and 3c comprising the avian coronaviruses. They are worldwide in distribution and can cause respiratory, enteric and in some cases hepatitis and neurological diseases in a wide variety of animals, resulting in economic losses to breeders and breeding. In this study, we describe an outbreak of diarrhea in a herd of capybaras found in the city of Piracicaba, São Paulo, Brazil. The animals had sudden symptoms of anorexia, profuse and watery diarrhea, yellowish or greenish, dehydration, weight loss, sharp and twisting of limbs leading to death in less than a week, mostly weaned and with an age of three months. A total of 59 stool samples and 10 fragments of small intestine were processed for negative staining technique (rapid preparation). By transmission electron microscope a large number of particles with morphology similar to coronavirus, pleomorphic, rounded or elongated features with radial projections form a corona and measuring 80-140 nm in diameter, was visualized in all samples analyzed. The technique was extremely useful for rapid viral diagnosis in the affected animals.

Coronavirus están envueltos en una cadena positiva de ARN, (orden Nidovirales, familia Coronaviridae) y se clasifican en tres grupos. Grupos que integran la tercera 3c y los coronavirus aviario. Se distribuyen por todo el mundo y pueden causar enfermedades respiratorias, entéricas y, en algunos casos, hepatitis y enfermedades neurológicas en una amplia variedad de animales, resultando en pérdidas económicas a la ganadería y los criadores. En este trabajo se describe un brote de diarrea en un rebaño de capibaras en la ciudad de Piracicaba, São Paulo, Brasil. Los animales presentaron súbitamente, los síntomas de anorexia, diarrea, profusa y acuosa, de color amarillento o verdoso, deshidratación, pérdida de peso, agudo, torsión de los miembros y la muerte en menos de una semana, en su mayoría con tres meses de edad. Un total de 59 muestras de heces y 10 trozos de intestino delgado se procesaron por la técnica de contraste negativo (preparación rápida). En todas las muestras analizadas, al microscopio electrónico de transmisión se visualizó un gran número de partículas con morfología similar a los coronavirus, pleomórficas, con características redondeadas o alargadas con proyecciones radiales en forma de corona midiendo de 80-140 nm de diámetro. La técnica es sumamente útil para el diagnóstico rápido de virus en animales afectados.